金標(biāo)卡殼膠體金在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用

　　1、免疫印跡
　　免疫印跡是將聚丙烯酞胺凝膠電泳分離的蛋白質(zhì)區(qū)帶轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜，然后用酶免疫法(或免疫熒光、RIA)進(jìn)行定量分析。同理，金標(biāo)卡殼免疫膠體金也可用于免疫印跡，將轉(zhuǎn)移后的硝酸纖維素膜與特異性的抗體保溫后，再與葡萄球菌曰堪麥白致敏的膠體金反應(yīng)，洗去多余的膠體金，根據(jù)膜上膠體金顆粒顏色深淺推測(cè)樣品中特異性抗原的多少。金標(biāo)卡殼膠體金免疫印跡技術(shù)簡(jiǎn)便、且有相當(dāng)高的靈敏度，在臨床免疫診斷上具有很大的應(yīng)用潛力。
　　2、免疫金電鏡
　　免疫金電鏡的應(yīng)用己經(jīng)由對(duì)組織細(xì)胞定位研究，進(jìn)一步深入到了基因轉(zhuǎn)錄水平、基因表達(dá)檢測(cè)、染色體基因定位、特定核酸序列在細(xì)胞內(nèi)的空間分布分析及核酸復(fù)制過(guò)程中的定性或定量分析等。膠體金標(biāo)記抗地高辛抗體的非同位素核酸探針技術(shù)，在核酸測(cè)定、PCR產(chǎn)物分析及原位雜交等分析方面用處很大。近年來(lái)，鏈霉親和素一膠體金探針在原位雜交及免疫細(xì)胞化學(xué)研究中嶄露頭角，不但可在染色質(zhì)和染色體上進(jìn)行DNA序列超微結(jié)構(gòu)水平的   定位，而且可用于哺乳動(dòng)物組織成長(zhǎng)、相關(guān)、病毒基因型和表現(xiàn)型的實(shí)驗(yàn)室診斷，己成為一種具有廣闊應(yīng)用前景的新型細(xì)胞化學(xué)檢驗(yàn)試劑。
　　3、流式細(xì)胞儀
　　應(yīng)用熒光素標(biāo)記的抗體，通過(guò)流式細(xì)胞儀計(jì)數(shù)分析細(xì)胞表面抗原，是免疫學(xué)研究的重要技術(shù)之一。Boehmer等發(fā)現(xiàn)，膠體金可以改變紅色激光的散射角，他們將膠體金標(biāo)記的羊抗鼠IgG體應(yīng)用于流式細(xì)胞術(shù)來(lái)分析不同細(xì)胞的表面抗原。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，小鼠的脾細(xì)胞可同時(shí)被與熒光素和膠體金結(jié)合的抗體所標(biāo)記，兩者互不干擾。因此，膠體金可作為多參數(shù)細(xì)胞分析和分選的標(biāo)記物，分析各類細(xì)胞表面標(biāo)志滾面受體和表面抗原瑪細(xì)胞內(nèi)含物。
　　4、診斷
　　免疫膠體金診斷技術(shù)是基于酶聯(lián)免疫
　　吸附試驗(yàn)、乳膠凝集試驗(yàn)、單克隆抗體技術(shù)、免疫膠體金技術(shù)和新材料技術(shù)的，具有便捷、靈敏、   、成本低等特點(diǎn)，在診斷中推廣，己日趨成熟。1980年，Leuvering   早報(bào)道了用膠體金檢測(cè)人絨毛膜促性腺(hCG)的凝集試驗(yàn)。之后，1985年商品試劑盒研制成功，從此膠體金成為免疫學(xué)測(cè)定方法研究的新熱點(diǎn)。新的方法和試劑盒層出不窮，主要應(yīng)用于和殘留檢測(cè)，相關(guān)蛋白、抗原或抗體檢測(cè)。該技術(shù)結(jié)合信號(hào)放大系統(tǒng)可以對(duì)微量物質(zhì)進(jìn)行定量檢測(cè)，也可以同時(shí)對(duì)多種對(duì)象進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)具有聯(lián)檢意義的物質(zhì)具有很大的應(yīng)用價(jià)值。
　　5、生物傳感器
　　近年來(lái)，金標(biāo)記被引入生物傳感器中的應(yīng)用研究不斷增多。Kim通過(guò)交流電導(dǎo)法檢測(cè)了在叉指電極上的金標(biāo)記的免疫凝集，從而實(shí)現(xiàn)了膠體金免疫層析試驗(yàn)的電化學(xué)檢測(cè)方法，并且通過(guò)在膠體金上包被導(dǎo)電聚苯胺，提高電導(dǎo)法測(cè)定金標(biāo)免疫反應(yīng)的靈敏度。Brainina在膠體金標(biāo)記A蛋白的基礎(chǔ)上，制作了診斷森林腦炎的電化學(xué)免疫傳感器，用于測(cè)定血清中的森林腦炎抗體及其濃度。
　　6、其他方面
　　①作為免疫原性物質(zhì)。2004年，Dykman對(duì)膠體金顆粒的免疫原性進(jìn)行了試驗(yàn)研究，用膠體金作為半抗原的載體來(lái)免疫試驗(yàn)動(dòng)物，發(fā)現(xiàn)膠體金有直接免疫佐劑活性，可以增強(qiáng)非特異性免疫反應(yīng)，提高血液中溶菌酶的濃度、補(bǔ)體活性、吞噬作用和作用。此外，以膠體金一半抗原作為免疫原同抗原一樣，無(wú)需弗氏佐劑即可誘導(dǎo)抗體的形成，且與用弗氏佐劑相比抗原用量少。②作為免疫增強(qiáng)佐劑。2003年，Zhao將各膠體金顆粒和編碼日本腦炎病毒PrM-E蛋白的質(zhì)?；旌徒臃N小鼠，可增強(qiáng)誘發(fā)抗病毒蛋白和保護(hù)性免疫反應(yīng)的產(chǎn)生。這種方法可用于抗日本腦炎病毒的新型DNA疫苗。同年，Zhang等發(fā)現(xiàn)，金顆粒作為佐劑對(duì)DNA疫苗的電穿孔擴(kuò)張有免疫增強(qiáng)作用。③作為載體。Paciott等研究了金顆粒在體內(nèi)傳送的作用，發(fā)現(xiàn)膠體金顆粒在小鼠體內(nèi)可引導(dǎo)壞死因子(TNF)到達(dá)實(shí)體瘤。PT(硫醇化的PEG)-Au重組TNF復(fù)合物與的TNF相比毒性   小、可   的減小，而且用   少劑量的獲得   大的抗效應(yīng)。