膠體金及金標卡板膠體金標記技術

　　膠體金標記技術是繼熒光素、放射性同位素和酶標記技術之后又一重要的標記技術。自1971年Faulk和Taylor   將膠體金標記技術引入免疫組織化學以來，膠體金標記技術了發(fā)展，因其具有其他標記技術所沒有的特性，正在被廣泛地運用于生物醫(yī)學、臨床診斷等。近些年，在膠體金標記技術基礎上發(fā)展起來的膠體金免疫診斷技術已成為而又敏感的免疫檢測技術之一，具有廣闊的應用前景。基于酶聯(lián)免疫吸附試驗、乳膠凝集試驗、單克隆抗體技術、層析技術、膠體金技術和新材料技術基礎上發(fā)展起來的膠體金免疫診斷技術在目前的醫(yī)學檢驗中主要有兩種：斑點免疫金滲濾法和膠體金免疫層析法。而金標卡板膠體金免疫層析技術具有操作簡便、、操作人員無需技術培訓、無需儀器設備、試劑穩(wěn)定和便于保存等特點，已成為“床邊檢驗”(PointofCareTesting)的主要方法之一。
　　膠體金是指氯金酸(HAuCl4)在還原劑的作用下聚合成大小的金顆粒，形成帶負電的疏水性膠溶液，由于靜電作用而形成穩(wěn)定膠體狀態(tài)。膠體金溶液中的分散相(金顆粒)大小在1~150nm，屬于多相不均勻體系，膠體顏色從橘紅色向紫紅色過渡。膠體金顆粒由一個基礎金核(原子金)及包圍在外圍的雙離子層構(gòu)成，內(nèi)層為AuCl2-負離子層，外層為分散在溶液中的H+，由此產(chǎn)生的靜電引力維系膠體的穩(wěn)定狀態(tài)。膠體金的制備   常用的方法是化學還原法，常用的還原劑有檸檬酸三鈉、靴酸、抗壞血酸、硫氰酸鹽等。根據(jù)還原劑類型和還原作用的強弱，可以控制產(chǎn)生出0.8~150nm的膠體金，還原劑用量越大，制各的金顆粒直徑越小。
　　膠體金顆粒具有高電子密度、在弱堿性條件下其表面帶有負電荷的特性，能夠和蛋白質(zhì)的正電荷基團牢固地結(jié)合在一起。據(jù)報道，當金顆粒聚集密度達到1000萬個/m㎡，即可出現(xiàn)肉眼可見的粉紅色斑點。膠體金標記實際上是蛋白質(zhì)等高分子物質(zhì)在膠體金顆粒表面的包被過程。由于金顆粒與蛋白質(zhì)之間是靜電結(jié)合，此過程并不影響蛋白質(zhì)分子的生物學特性。因金顆粒對蛋白有的吸附力，可以與葡萄球菌A蛋白、抗體、毒素、酶、牛血清白蛋白等非共價結(jié)合，已成為基礎研究和臨床實驗中的重要工具。